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+ Wie wähle ich mein Antigen aus?
Welche Art von Antigen(en) können injiziert werden, um maßgeschneiderte polyklonale Antikörper zu erhalten?
Native Proteine, die aus der natürlichen Quelle gereinigt wurden, rekombinante Proteinfragmente oder Proteine in voller Länge (exprimiert in einer Vielzahl von Wirten wie E. coli, Säugetierzellen usw.), chemische Peptide (bis zu 22 aa) oder andere Verbindungen mikrobiellen, pilzlichen oder viralen Ursprungs
Wenn die polyklonalen Antikörper auf dem denaturierten Zielprotein verwendet werden sollen (Beispiel: Western Blot, Immunhistochemie an festen Geweben), werden denaturierte Formen von Antigenen bevorzugt (wie Gelstück, Protein in Einschlusskörpern).
Wenn die polyklonalen Antikörper auf nativen Zielproteinen eingesetzt werden sollen (Beispiel: Immunpräzipitation), werden nicht denaturierte Antigenformen bevorzugt (Protein in Lösung frei von Denaturierungsmitteln).
Jede dieser Kategorien hat unterschiedliche Stärken und Schwächen:
- Native Proteine bilden ausgezeichnete Antigene und wurden traditionell verwendet, um maßgeschneiderte polyklonale Antikörper für verschiedene Zwecke zu produzieren. Einige Proteine sind jedoch nicht einfach in ausreichender Menge für die Charakterisierung zu isolieren. Nur ein kleiner Teil dieser potenziell nützlichen Proteine wurde isoliert und charakterisiert. Dies macht die meisten nativen Proteine unpraktisch, um kundenspezifische polyklonale Antikörper zu erzeugen.
- Die logischste Alternative ist rekombinantes Protein, das normalerweise in E. coli produziert wird (siehe unser Standardpaket 3, in dem die rekombinante Proteinproduktion enthalten ist).
Proteine stellen unter Berücksichtigung ihrer Struktur und Größe starke Immunogene dar.
Wenn Sie ein vollständiges Protein als Antigen für Ihre individuelle Antikörperproduktion verwenden, ist es wichtig zu berücksichtigen, dass es verschiedene Bindungsstellen gibt, d.h. verschiedene erkannte Epitope, die die Spezifität verringern, aber die Zugänglichkeit erhöhen können. Das Ausfallrisiko, z.B. durch ein unzugängliches Epitop, ist daher sehr gering.
Fragmente von Proteinen sind im Allgemeinen einfacher zu produzieren als ein Protein in voller Länge.
Es überwindet die Grenzen kurzer Peptide, erfordert aber mehr Aufwand und Kosten für deren Herstellung. ProteoGenix' umfangreiche Erfahrung in der rekombinanten Proteinproduktion garantiert die höchste Erfolgsrate bei der Produktion von hochwertigem Antigen, das für die Qualität Ihrer individuellen Antikörperproduktion entscheidend ist.
- Chemisches Peptid ist ein beliebtes Antigen für die polyklonale Ab-Entwicklung.
Die Peptidsynthese ist schneller und billiger als die Proteinproduktion, aber nicht alle Anti-Peptid-Antikörper werden in der Lage sein, das native Protein zu erkennen, daher ist eine sorgfältige Auswahl der Peptidsequenz von entscheidender Bedeutung, weshalb wir das Peptiddesign immer mit unserem eigenen proprietären Peptiddesign-Tool in unsere Dienstleistungen für polyklonale Anti-Peptid-Antikörper aufnehmen.
Anti-Peptid-Antikörper zeigen eine erhöhte Spezifität, die es ermöglicht:
- Eliminiert oder minimiert mögliche Kreuzreaktionen zwischen strukturell homologen Proteinen.
- Ermöglicht die Produktion von polyklonalen Antikörpern gegen das Ziel-Epitop.
- Ermöglicht die Produktion von polyklonalen Antikörpern für Proteine mit post-translationalen Modifikationen.
- Ermöglicht die Unterscheidung zwischen zwei oder mehreren Isoformen eines Proteins. (Es ist auch möglich, ein Peptid zu wählen, das auf 2 Proteinen vorhanden ist, wenn der Zweck darin besteht, sie beide nachzuweisen!)
Peptide sind auch sehr nützlich für die Herstellung von Antiserum gegen post-translationale Modifikationen. Siehe unser Phospho-spezifisches Antikörper-Paket)
Die gegen Peptide generierten Antikörper wirken in der Regel besser für WB und ICH, wo Antigene vollständig oder zumindest teilweise denaturiert sind.
Das Hauptrisiko bei Anti-Peptid-Antikörpern besteht darin, dass der Antikörper das native Protein nicht erkennt, wenn der polyklonale Antikörper beispielsweise ein unzugängliches Epitop bindet. Es kann auch nicht gut polyklonale Antikörper liefern, insbesondere für Immunoassays, die gefaltetes Protein zeigen.
Unser Peptiddesign-Tool kann jedoch helfen, solche Probleme zu lösen, indem es Oberflächenepitope und posttranslationale Modifikationen voraussagt.
Wir empfehlen in der Regel auch die Verwendung von 2 oder 3 Peptiden, um das Risiko der Zugänglichkeit eines Epitops für die Antiserumproduktion zu reduzieren
Native Proteine, die aus der natürlichen Quelle gereinigt wurden, rekombinante Proteinfragmente oder Proteine in voller Länge (exprimiert in einer Vielzahl von Wirten wie E. coli, Säugetierzellen usw.), chemische Peptide (bis zu 22 aa) oder andere Verbindungen mikrobiellen, pilzlichen oder viralen Ursprungs
Wenn die polyklonalen Antikörper auf dem denaturierten Zielprotein verwendet werden sollen (Beispiel: Western Blot, Immunhistochemie an festen Geweben), werden denaturierte Formen von Antigenen bevorzugt (wie Gelstück, Protein in Einschlusskörpern).
Wenn die polyklonalen Antikörper auf nativen Zielproteinen eingesetzt werden sollen (Beispiel: Immunpräzipitation), werden nicht denaturierte Antigenformen bevorzugt (Protein in Lösung frei von Denaturierungsmitteln).
Jede dieser Kategorien hat unterschiedliche Stärken und Schwächen:
- Native Proteine bilden ausgezeichnete Antigene und wurden traditionell verwendet, um maßgeschneiderte polyklonale Antikörper für verschiedene Zwecke zu produzieren. Einige Proteine sind jedoch nicht einfach in ausreichender Menge für die Charakterisierung zu isolieren. Nur ein kleiner Teil dieser potenziell nützlichen Proteine wurde isoliert und charakterisiert. Dies macht die meisten nativen Proteine unpraktisch, um kundenspezifische polyklonale Antikörper zu erzeugen.
- Die logischste Alternative ist rekombinantes Protein, das normalerweise in E. coli produziert wird (siehe unser Standardpaket 3, in dem die rekombinante Proteinproduktion enthalten ist).
Proteine stellen unter Berücksichtigung ihrer Struktur und Größe starke Immunogene dar.
Wenn Sie ein vollständiges Protein als Antigen für Ihre individuelle Antikörperproduktion verwenden, ist es wichtig zu berücksichtigen, dass es verschiedene Bindungsstellen gibt, d.h. verschiedene erkannte Epitope, die die Spezifität verringern, aber die Zugänglichkeit erhöhen können. Das Ausfallrisiko, z.B. durch ein unzugängliches Epitop, ist daher sehr gering.
Fragmente von Proteinen sind im Allgemeinen einfacher zu produzieren als ein Protein in voller Länge.
Es überwindet die Grenzen kurzer Peptide, erfordert aber mehr Aufwand und Kosten für deren Herstellung. ProteoGenix' umfangreiche Erfahrung in der rekombinanten Proteinproduktion garantiert die höchste Erfolgsrate bei der Produktion von hochwertigem Antigen, das für die Qualität Ihrer individuellen Antikörperproduktion entscheidend ist.
- Chemisches Peptid ist ein beliebtes Antigen für die polyklonale Ab-Entwicklung.
Die Peptidsynthese ist schneller und billiger als die Proteinproduktion, aber nicht alle Anti-Peptid-Antikörper werden in der Lage sein, das native Protein zu erkennen, daher ist eine sorgfältige Auswahl der Peptidsequenz von entscheidender Bedeutung, weshalb wir das Peptiddesign immer mit unserem eigenen proprietären Peptiddesign-Tool in unsere Dienstleistungen für polyklonale Anti-Peptid-Antikörper aufnehmen.
Anti-Peptid-Antikörper zeigen eine erhöhte Spezifität, die es ermöglicht:
- Eliminiert oder minimiert mögliche Kreuzreaktionen zwischen strukturell homologen Proteinen.
- Ermöglicht die Produktion von polyklonalen Antikörpern gegen das Ziel-Epitop.
- Ermöglicht die Produktion von polyklonalen Antikörpern für Proteine mit post-translationalen Modifikationen.
- Ermöglicht die Unterscheidung zwischen zwei oder mehreren Isoformen eines Proteins. (Es ist auch möglich, ein Peptid zu wählen, das auf 2 Proteinen vorhanden ist, wenn der Zweck darin besteht, sie beide nachzuweisen!)
Peptide sind auch sehr nützlich für die Herstellung von Antiserum gegen post-translationale Modifikationen. Siehe unser Phospho-spezifisches Antikörper-Paket)
Die gegen Peptide generierten Antikörper wirken in der Regel besser für WB und ICH, wo Antigene vollständig oder zumindest teilweise denaturiert sind.
Das Hauptrisiko bei Anti-Peptid-Antikörpern besteht darin, dass der Antikörper das native Protein nicht erkennt, wenn der polyklonale Antikörper beispielsweise ein unzugängliches Epitop bindet. Es kann auch nicht gut polyklonale Antikörper liefern, insbesondere für Immunoassays, die gefaltetes Protein zeigen.
Unser Peptiddesign-Tool kann jedoch helfen, solche Probleme zu lösen, indem es Oberflächenepitope und posttranslationale Modifikationen voraussagt.
Wir empfehlen in der Regel auch die Verwendung von 2 oder 3 Peptiden, um das Risiko der Zugänglichkeit eines Epitops für die Antiserumproduktion zu reduzieren
Schritt 1: Wählen Sie Ihr Antigen aus
-
PEPTID123 -
PROTEIN -
PHOSPHOPEPTID -
Ich stelle mein eigenes Antigen zur Verfügung
Please note that the price includes a 20 AA peptide. Peptides over 20 AA will be extra charged.
Please note that the price includes a protein up to 500bp. Proteins over 500bp will be extra charged.
Rot markierte Buchstaben entsprechen keiner Aminosäure, die von unserem System erkannt wird. Es ist entweder ein Tippfehler oder eine mögliche spezifische Änderung. Bitte korrigieren Sie den Tippfehler oder entfernen Sie die Änderung und wählen Sie sie im nächsten Schritt aus, um fortzufahren.
Sequenz gesendet.
Ihre Sequenz enthält mehr als 8 aufeinanderfolgende identische Zeichen oder Lys oder Arg, was zu Syntheseschwierigkeiten führen kann, und die Sequenz sollte von unserem Chemiker überprüft werden, um ein Angebot zu erstellen.
Kleinbuchstaben werden von unserem System als D-Aminosäuren betrachtet, wenn Sie diese Art von Aminosäuren nicht benötigen, ersetzen Sie bitte gelb markierte Buchstaben durch Großbuchstaben.
+ Welche Menge an Antigen benötigen Sie?
| Kaninchen | >1.1mg of protein or >2.2mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Huhn | >2.5mg of protein or >2.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Meerschweinchen | >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Ratte | >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Maus | >0.4mg of protein or >0.6mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Goat & Sheep | >10mg of protein or >10mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. |
You will be able to detail your needs at next step (species,...)
Bitte geben Sie Ihre Kontaktdaten ein und wählen Sie ein Paket aus, um die Preise zu sehen:
Als erfahrener Hersteller von Antikörpern hat ProteoGenix in den vergangenen 13 Jahren bereits mehr als 1500 verschiedene polyklonale Antikörper erzeugt.
Antigen-Lokalisierung:
Wir bieten bis zu neun verschiedene Tierarten zur Erzeugung Ihres polyklonalen Antikörpers. Am häufigsten wird der polyklonale Kaninchen-Antikörper gewählt. Andere Spezies können zum Beispiel für Co-Färbestudien oder hochkonservierte Target-Proteine sinnvoll sein.
Step 2: choose your protocol
Wählen Sie eine Tierart aus:
-
KANINCHEN -
HUHN -
MEERSCHWEINCHEN -
RATTE -
MAUS -
ZIEGE -
SCHAF -
ANDERE
Phosphopeptid ist bei dieser Spezies nicht möglich, bitte wählen Sie eine andere Spezies.
+ Definieren Sie die am besten geeignete Spezies für Ihre polyklonale Antikörperpräparation
| Serummenge/Endgewinnung (je Tier) | Bemerkung | |
|---|---|---|
| Kaninchen | 30–40 ml Antiserum oder 1–10 mg aufgereinigte Antikörper | Polyklonale Kaninchen-Antikörper sind die erste Wahl zur Erzeugung von Antikörpern. + Bester Kompromiss im Hinblick auf Kosten und Antikörpermenge. |
| Huhn | 20–25 ml Antiserum/Projekt oder 1–10 mg aufgereinigte Antikörper | Huhn-Antikörper haben einen größeren phylogenetischen Abstand zu Säugetierarten. + Im Lauf der Jahre 5- bis 10-mal mehr Antikörper als bei Kaninchen, da die Antikörper aus dem Eidotter gewonnen werden. + Huhn-IgY-Antikörper erzeugen in Säugetieranwendungen in der Regel weniger Hintergrund als polyklonale Kaninchen-Antikörper. |
| Meerschweinchen | 2,5–5 ml Antiserum oder 1–10 mg aufgereinigte Antikörper | + Die Immunantwort tritt in der Regel schnell ein und ist stark. + Nur geringe Antigenmenge erforderlich. - Sehr empfindliches Tier, das vorsichtig gehandhabt werden muss. - Geringe Menge an Antikörpern/Serum. |
| Ratte | 2,5–5 ml Antiserum oder 1–10 mg aufgereinigte Antikörper | Häufig als Alternative zu Mäusen bei monoklonalen Antikörpern genutzt. - Bei Ratten-Antikörpern ist die Menge an Antikörpern/Serum ebenfalls gering. |
| Maus | 300-500µl antiserum oder 10-100 µg gereinigte Antikörper. | + Gute Alternative, wenn mehrere Antikörperspezies für gleichzeitige Mehrfach-Färbung benötigt werden. + Starke Immunantworten. - Geringe Menge an Antikörpern/Serum. |
| Goat & Sheep | 500-1000 ml of antiserum or >20mg of purified antibodies. | + Ziegen- und Schaf-Antikörper liefern große Mengen an Antiserum/Antikörpern. - Es ist schwieriger, präimmunes Serum von mehreren Tieren zu testen, um dasjenige zu wählen, das am wenigsten Hintergrund/Kreuzreaktivität mit den zu testenden Proben zeigt. - Teurer als (z. B.) polyklonale Kaninchen-Antikörper. |
Wie viele Tiere sollen immunisiert werden?
-
1 -
2 -
3 -
4 -
5 -
10 -
ANDERE
Wir können alle Schritte der Entwicklung Ihrer individuellen polyklonalen Antikörper an Ihren Zeitrahmen, Ihr Budget und Ihre Erfordernisse anpassen, um Ihre Anforderungen exakt zu erfüllen. Sie können entweder unser eigenes Herstellungsprotokoll für polyklonale Antikörper zur Verfügung stellen, unser XpressWay-Protokoll wählen oder ein Standardprotokoll mit optionalen Erweiterungen nutzen.
Protokolldauer:
-
STANDARD
+ OPTIONALE ERWEITERUNG -
XPRESSWAY - 30 DAYS
Just for rabbit and mouseXpressWay nicht verfügbar für PeptideAvailable just for rabbit and mouse -
INDIVIDUELL
Endanwendung des Antikörpers:
-
ELISA -
WB -
IHC -
IF -
DURCHFLUSSZYTOMETRIE -
IP -
SANDWICH-ELISA -
ANDERE
Bei allen unseren Paketen zur Herstellung von polyklonalen Antikörpern garantieren wir ELISA-Titer; bei polyklonalen Anti-Protein-Antikörpern können wir zudem positive WB-Ergebnisse garantieren (siehe Paket 3)
Bitte geben Sie Ihre Kontaktdaten ein, um den Preis anzuzeigen:
Ca.-Preis
€ n. z.
(zzgl. Versand/USt.)
Herstellung von individuellen Antikörpern
RABATT:
ESTIMATED DURATION*: n. z.
Duration is predicted and indicative and can vary depending on several factors
Antigentyp: Protein
Antigen bereitgestellt von: Ihnen
Protein-Lokalisierung: Zytoplasma
Ausgewähltes Tier: Maus
Anzahl der Tiere für Injektionen: 1
Protokolldauer: Standard
Endgültige Antikörperanwendung: ELISA
Antikörperaufreinigung: Keine Aufreinigung
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