Services zur herstellung von rekombinanten proteinen

Formular Proteinherstellung

    We are your protein production experts
    1500+ PROTEINS5 SYSTEMS
    Experten in Sachen Proteinherstellung
    Über 1500 PROTEINE
    5 SYSTEME

    Mit mehr als 15 Jahren Erfahrung in der Herstellung von kundenspezifischen Proteinen und über 1500 erfolgreich produzierten Proteinen in 5 Systemen ist ProteoGenix ein führender Anbieter von schwierig zu exprimierenden rekombinanten Proteinen und AntikörpernMEHR ERFAHREN

    Mit mehr als 15 Jahren Erfahrung in der Herstellung von kundenspezifischen Proteinen und über 1500 erfolgreich produzierten Proteinen in 5 Systemen ist ProteoGenix ein führender Anbieter von schwierig zu exprimierenden rekombinanten Proteinen und AntikörpernMEHR ERFAHREN

    Recombinant protein synthesis services
    Experten für die Herstellung schwierig zu exprimierender Proteine

    Wir bieten Services für die Proteinexpression und -aufreinigung im Labor- und Industriemaßstab auf jeder unserer 5 Plattformen zu günstigen Preisen sowie aufwändigere und maßgeschneiderte Pakete, in denen wir beispielsweise die Expressionsbedingungen für rekombinante Proteine in mehreren Systemen parallel oder erweiterte Proteinexpressionsbedingungen in einem bestimmten System testen. Unser Service beinhaltet sämtliche Schritte von der Gensynthese über die Konstruktion des Expressionsvektors bis hin zur Pilotherstellung in Kulturflaschenund zur Proteinexpression im Industriemaßstab in Fermentern und Bioreaktoren.

    Unser Hochdurchsatz-Screening von Proteinexpressionsbedingungen ist darauf ausgelegt, Probleme im Zusammenhang mit Löslichkeit, Reinheit, Funktion, Produktivität, Refolding oder Formulierung zu überwinden. Dieses Versprechen einzulösen setzt Verfügbarkeit und Beherrschung aller bestehenden Technologien, Prozesse und Werkzeuge voraus. Auf Basis umfassender Erfahrung in der Expression von rekombinanten Proteinen beliebiger Art wie Antikörpern, Enzymen, Membranproteinen, Zytokinen usw. und unterschiedlichsten Spezies hat ProteoGenix ein vollständiges Instrumentarium für alle Herausforderungen entwickelt, um erstklassige Protein-Engineering-Services zu bieten, mit denen sich jede Herausforderung in diesem Bereich meistern lässt. Probieren Sie Pakete mit Garantie vom zuverlässigsten Proteinhersteller seiner Art aus.

    E. coli

    Discover our E.coli protein production service

    PROTEIN-
    EXPRESSION IN E. COLI

    Periplasmische Expression, Refolding-Tests,
    Pakete mit Garantie, Endotoxinentfernung, kundenspezifische E.-coli-Expression,
    Proteinherstellung in Bakterien

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    Multi system

    Learn more about our multi-system protein production service

    MULTISYSTEM-
    EXPRESSIONSPAKETE

    Wenn das optimale System nicht bekannt ist: Tests in bis
    zu 5 Systemen, Lieferung aufgereinigter Proteine aus
    jedem System

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    B. subtilis

    Discover our B. subtilis protein synthesis service

    PROTEIN-
    HERSTELLUNG IN B. SUBTILIS

    Niedrige Endotoxinwerte,
    Sekretion von rekombinanten Proteinen,
    Proteincharakterisierung

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    Hefe

    Discover our Yeast protein production service

    PROTEIN-
    HERSTELLUNG IN HEFE

    Saccharomyces cerevisia,
    Pichia pastoris,
    stabile Expression

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    HTP

    Discover our High Throughput protein expression screening service

    HOCHDURCHSATZ-
    EXPRESSIONS-SCREENING

    Für schwierig zu exprimierende Proteine, über 1000
    Expressionsbedingungen, Labormaßstab,
    Hochdurchsatz-Screening

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    Insektenzellen

    Discover our High Throughput protein expression screening service

    PROTEIN PRODUCTION IN
    INSECT CELLS / BACULOVIRUS

    Sf9, Sf21, Hi5, glycosylated proteins,
    protein purification, baculovirus
    production

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    Säuger

    Discover our Mammalian cells protein production service

    PROTEIN HERSTELLUNG
    IN SÄUGERZELLEN

    Transiente Expression, Herstellung von rekombinanten Antikörpern,
    SEC- und IEX-Aufreinigung,
    niedrige Endotoxinwerte, CHO, HEK293, BHK

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    Stabile Zelllinie

    Learn more about our stable cell line

    ENTWICKLUNG VON
    STABILEN ZELLLINIEN

    IP-freie Systeme, garantierte Ausbeute, Prozess-
    entwicklung, stabile HEK293- und CHO-
    Zelllinie

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    RAB

    Learn more about protein production in bioreactor and fermenter

    REKOMBINANTE MONOKLONALE
    ANTIELLUNG KÖRPERHERST

    Kostengünstige Herstellung,
    garantierte Ausbeute,
    HTP-Antikörpervarianten

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    Industriemaßstab

    Learn more about protein production in bioreactor and fermenter

    FERMENTER/BIOREAKTOR,
    PROTEINHERSTELLUNG IN INDUSTRIEMASSSTAB

    1 bis4.000 l in 5 Systemen,
    Aufreinigungsservices in Industriemaßstab,
    Prozessentwicklungsservices

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    Kundenspezifische Proteinherstellung –
    Kundenstimme

    „“ Ich habe mich kürzlich für ProteoGenix entschieden, um ein rekombinantes Protein in HEK293-Zellen herzustellen. Die hohe Produktivität und starke Aktivität des erhaltenen Proteins, wahrscheinlich durch die richtige Glykosylierung und Faltung, ermöglichte es uns, spannende Ergebnisse in Funktionsstudien zu erzielen und neue Meilensteine in unserem Forschungsprojekt zu erreichen. Die Qualität der Dienstleistung und die reibungslose und freundliche Kommunikation mit dem für unser Projekt verantwortlichen Kundenbetreuer waren ausschlaggebend für diesen Erfolg. Ich empfehle ProteoGenix gerne für die rekombinante Proteinproduktion. „

    production_portrait01
    Dr. Christian BRONNER,
    leitender
    Wissenschaftler am CNRS

    Warum ist ProteoGenix der richtige Partner für die Herstellung Ihres rekombinanten Proteins?

    Process development experience
     MMehr als 16 Jahre herausragende Erfolgsgeschichte in der Herstellung von schwer exprimierbaren Proteinen
    5 protein expression systems
    5 5 Proteinexpressionssysteme und ein vollständiges Instrumentarium zur Bewältigung jeder Herausforderung in der Proteinexpression
    One stop solution from gene to protein
    Komplettlösung vom Gen bis zum Protein, von der Prozessentwicklung bis zur Produktion im Industriemaßstab.
    IP Free strains and cell lines
    IP-freie Stämme und Zelllinien
    transient protein expression service
    Herstellung im sehr kleinen bis großen Maßstab mit Chargen von 1 bis 4.000 l
    Transient expression and stable cell line
    Produktivität von bis zu 800 mg/l bei transienter Expression und 5 g/l bei stabiler Expression

    Why Choose ProteoGenix

     MMehr als 16 Jahre herausragende Erfolgsgeschichte in der Herstellung von schwer exprimierbaren Proteinen

    5 5 Proteinexpressionssysteme und ein vollständiges Instrumentarium zur Bewältigung jeder Herausforderung in der Proteinexpression

    One-stop solution from gene to protein, process development and large scale production. Consequences: faster service, increased success rate, less administrative work.

    IP-freie Stämme und Zelllinien

    Herstellung im sehr kleinen bis großen Maßstab mit Chargen von 1 bis 4.000 l

    Produktivität von bis zu 800 mg/l bei transienter Expression und 5 g/l bei stabiler Expression

    Fermentierungsanlagen

    fermentation-lab
    proteogenix-bioreactors

    Fallstudie:

    Beispiel der Herstellung eines Beta-Glucosidase-Proteins in Insektenzellen

    ERBRACHTER SERVICE

    Wir wurden von einem Kunden beauftragt, ein rekombinantes Beta-Glucosidase-Proteins unter Nutzung eines Baculovirus-Expressionssystems (Erzeugung in Insektenzellen) herzustellen. Unser Kunde bestellte ein komplettes Insektenzellen-Paket mit Expressions- und Aufreinigungstests im Labormaßstab gefolgt von einer 1-l-Pilotherstellung und -aufreinigung. Wir erzielten mit der Labormaßstab-Expression eine Ausbeute von 370 mg/l und lieferten 60 mg an den Kunden. Die 1-l-Pilotherstellung war somit nicht mehr sinnvoll und wurde dem Kunden nicht in Rechnung gestellt. Der erbrachte Service bestand in den folgenden Schritten:

    MOLEKULARBIOLOGIE

    Chemische Synthese der für das Beta-Glucosidase-Protein codierenden cDNA nach Optimierung der Sequenz für die Expression in Insektenzellen. Anschließend Subklonierung in einem proprietären Expressionsvektor. Zur weiteren Aufreinigung Ergänzung einer für ein 6His-Tag codierenden Sequenz.

    EXPRESSIONSTESTS

    ERZEUGUNG VON P1-VIRUSSTOCK

    Abbildung 1. Analyse der Insektenzellenexpression während der P1-Erzeugung.
    Links: Coomassie-Blue-Färbung. Rechts: WB mit Anti-His-Antikörper (ECL-Substrat) „-“. Nicht transfizierte
    Kontrollkultur. 1 und 2 sind Transfektionen mit 2 verschiedenen Bacmid-Klonen.

    Schlussfolgerung des P1-Viruserzeugungsschritts

    Eine dem Molekulargewicht des Beta-Glucosidase-Proteins entsprechende Proteinbande ist in der SDS-PAGE von nativen Proteinextrakten zu erkennen. Dieses Ergebnis wird durch Western Blot bestätigt (Abb. 1, grüne Pfeile). Für die Expressionstests wurde der rekombinante Bacmid-Klon Nr. 1 verwendet.

    VIRUSAMPLIFIKATION UND EXPRESSIONSTESTS

    Abbildung 2. Proteinexpressionstests mit P2-Stock.
    Coomassie-Blue-Färbung. Links: Zelltyp 1.Rechts: Zelltyp 2. „-“. Negative Kontrollkultur.

    Schlussfolgerung der Expressionstests

    Die Expressionstests mit P2 bestätigen, dass das Target in hoher Konzentration in nativen Proteinextrakten vorliegt (Abb. 2, grüne Pfeile). Optimale Bedingungen für native Expression: Abbildung 2, roter Pfeil = Identifikationsgrenze

    AUFREINIGUNGSTESTS

    Abbildung 3. Proteinaufreinigungstest im Labormaßstab. Coomassie-Blue-Färbung.
    Links: Aufreinigungsprofil. Rechts: Abschluss-QK des Aufreinigungspools.
    IN = Input; FT = Flow-Through; W1–W3 = Waschschritte; E1–E9 = eluierte Fraktionen

    Schlussfolgerung der Aufreinigungstests im Labormaßstab

    Das rekombinante Beta-Glucosidase-Protein kann unter nativen Bedingungen hergestellt und aufgereinigt werden. Die Reinheit liegt bei ≥ 95 % und die Herstellungs-/Aufreinigungsausbeute bei ca. 370 mg/l. Das Baculovirus-Expressionssystem war die richtige Wahl für dieses Protein.

    Welches System sollten Sie für die Herstellung Ihres rekombinanten Proteins wählen?

    VERGLEICH DER 5 VON PROTEOGENIX ANGEBOTENEN EXPRESSIONSSYSTEME –
    PROKARYOTISCHE VS. EUKARYOTISCHE ZELLEXPRESSIONSSYSTEME

    Die nachstehende Tabelle gibt einen allgemeinen Überblick über die jeweiligen Vorteile der fünf unterschiedlichen heterologen Proteinexpressionssysteme zur Herstellung von rekombinanten Proteinen. Mehr Sterne bedeuten bessere Leistung.

    Expressions-
    system
    Zeit Kosten PTM Niedrige Endotoxinwerte Einfache Hochskalierung des Prozesses Sekretion
    E. coli **** **** * * *** *
    B. subtilis *** *** * **** *** **
    Hefe (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    * *** ** **** ** **
    Baculovirus/
    Insektenzellen
    * ** *** **** * ***
    Säugerzellen *** * **** **** ** ****

    Die nachstehende Tabelle gibt einen allgemeinen Überblick über die jeweiligen Vorteile der fünf unterschiedlichen heterologen Proteinexpressionssysteme zur Herstellung von rekombinanten Proteinen. Mehr Sterne bedeuten bessere Leistung.

    Expressions-
    system
    Zeit Kosten PTM Niedrige Endotoxinwerte Einfache Hochskalierung des Prozesses Sekretion
    E. coli **** **** * * *** *
    B. subtilis *** *** * **** *** **
    Hefe (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    * *** ** **** ** **
    Baculovirus/
    Insektenzellen
    * ** *** **** * ***
    Säugerzellen *** * **** **** ** ****
    Expressionssystem Zeitbedarf Preis
    E. coli 3–6 Wochen Schon ab
    1 650€
    B. subtilis 4–6 Wochen
    Hefe (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    6–7 Wochen
    Baculovirus/
    Insektenzellen
    8–11 Wochen
    Säugerzellen 7–9 Wochen

    ZEITBEDARF UND PREIS

    Expressionssystem Zeitbedarf Preis
    E. coli 3–6 Wochen Schon ab
    1 650€
    B. subtilis 4–6 Wochen
    Hefe (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    6–7 Wochen
    Baculovirus/
    Insektenzellen
    8–11 Wochen
    Säugerzellen 7–9 Wochen

    Leistungsumfang
    Expressions- und Aufreinigungsprüfung im Labormaßstab mit Test zahlreicher Expressionsbedingungen
    1-l-Herstellung und -Aufreinigung

    NICHT-ERSCHÖPFENDE MULTI-EXPRESSIONSSYSTEM-PAKETE

    Paketcode Typ Systeme Preis
    ATX-PTR4S01 4-System-
    Expressionspaket
    E. coli/Hefe/Baculovirus/
    Säugerzellen
    Schon ab
    2 450€
    ATX-PTR3S05 3-System-
    Expressionspaket
    B. subtilis/Hefe/Baculovirus
    ATX-PTR2S02 2-System-
    Expressionspaket
    E. coli/Baculovirus/

    Das gängigste System zur Aufreinigung von rekombinanten Proteinen ist E. coli (Escherichia Coli). Es ist tatsächlich das einfachste, schnellste und wirtschaftlichste System für die kundenspezifische Proteinexpression. Bakterienkulturen wachsen erheblich schneller als Insektenzellen, Säugerzellen oder Hefen und machen es somit möglich, eine große Zahl unterschiedlicher Bedingungen leichter und schneller zu testen. Es stehen mehr Lösungen für Tests zur Verfügung, sodass eine höhere Erfolgsquote bei der Expression rekombinanter Proteine möglich ist. Die transienten Expressionsausbeuten an rekombinanten Proteinen sind ebenfalls im Allgemeinen deutlicher höher als bei Hefe, Baculovirus/Insektenzellen oder Säugerzellen. Die Herstellung rekombinanter Proteine in E. coli ist häufig die von ProteoGenix vorgeschlagene bevorzugte Lösung, wenn die Endanwendung große Proteinmengen erfordert, wie etwa Kristallographie und Nuklearmagnetresonanz (NMR), und keine posttranslationalen Modifikationen (PTM) benötigt werden. Die größten Nachteile des E.-coli-Systems bestehen in der hohen Konzentration von Endotoxinen in der Endprobe sowie dem Fehlen von posttranslationalen Modifikationen. Die Endotoxine können entfernt werden, auch wenn dies im industriellen Maßstab wenig praktikabel ist, während es für die PTM-Problematik kaum eine andere Lösung als die Nutzung eines anderen Expressionssystems gibt. Mit diesen fünf Systemen sind wir in der Lage, die Anforderungen eines weiten Spektrums von Proteinsyntheseaufträgen zu erfüllen und können deshalb bei der Synthese von rekombinanten Proteinen eine Erfolgsquote von 95 % vorweisen. Wir arbeiten stets an der Integration neuer Systeme und Lösungen, um allen Kunden, die auf der Suche nach Dienstleistungen zur Herstellung von rekombinanten Proteinen mit hohen Qualitätsstandards sind, den besten Service zu bieten.

    Wenn Sie unsicher sind, welches System Sie wählen sollten, leiten wir Sie als führender Hersteller vom Gen bis zum Protein und bestimmen gemeinsam mit Ihnen die optimale Strategie für Ihren Zeitrahmen, Ihr Budget und die gewünschten Proteineigenschaften.

    Team, Kapazität, Organisation

    Unsere Labore zur Herstellung von rekombinanten Proteinen gliedern sich in mehrere Plattformen und unterstützende Labore, um beste Servicequalität, höchste Produktreinheit, das absolut niedrigste Kontaminationsrisiko und die beste Organisation für einen schnellen und zuverlässigen Service bereitzustellen.

    Wir verfügen über eine Plattform für jedes unserer fünf Systeme sowie ein separates Qualitätskontrolllabor, ein molekularbiologisches Labor, ein Verpackungslabor usw. Jede Plattform wird von erfahrenen Teamleitern verwaltet, die dafür sorgen, dass die gelieferten Proteine den Kundenspezifikationen entsprechen. Mit bis dato mehr als 1500 hergestellten Proteinen und auf jeweils ein System spezialisierten Teams verfügen wir über die beste Expertise für jedes dieser Systeme.

    Anwendungsgebiete für die Expression
    von rekombinanten Proteinen

    Die rekombinanten Proteine von ProteoGenix kommen in einem weiten Spektrum von Anwendungen zum Einsatz und unsere Kunden sind in Branchen wie pharmazeutische Industrie, Diagnostika, Biotechnologie, Agro- und Lebensmittelindustrie, Nutzpflanzenwissenschaft, neue Energien, Kosmetik und nationalen Forschungseinrichtungen tätig.

    Einige Beispiele für Anwendungsgebiete:

    • Kalibratoren, Positivkontrollen oder Capture-Komponenten in diagnostischen Tests
    • Herstellung von rekombinanten Antikörpervarianten zur Humanisierung von therapeutischen Antikörpern
    • Herstellung von Lebensmittelenzymen für die Lebensmittelverarbeitung oder -qualitätskontrolle
    • Rekombinantes Proteinantigen zur Herstellung von polyklonalen oder monoklonalen Antikörpern (Antigenpräparation)
    • Funktions- und Aktivitätsstudien
    • Kristallographie
    • Proteinwechselwirkungsstudien
    • Patentuntersuchungen
    • Mutations-Engineering-Studien zur Verbesserung der Wirksamkeit von Wirkstoffen in der Suchforschung