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+ ¿Cómo elegir mi antígeno?
¿Qué tipo de antígeno(s) se pueden inyectar para obtener anticuerpos policlonales personalizados?
Proteínas nativas purificadas de la fuente natural, fragmentos de proteínas recombinantes o proteínas de longitud completa (expresadas en una variedad de huéspedes como E. coli, células de mamíferos, etc.), péptidos químicos (hasta 22 aa) u otros compuestos de origen microbiano, fúngico o viral
Si los anticuerpos policlonales se van a utilizar en la proteína diana desnaturalizada (por ejemplo: Western blot, inmunohistoquímica en tejidos fijos), se prefieren formas desnaturalizadas de antígenos (como la pieza de gel, proteína en cuerpos de inclusión).
Si los anticuerpos policlonales se van a utilizar en proteínas diana nativas (por ejemplo: inmunoprecipitación), se prefieren formas de antígeno no desnaturalizadas (proteína en solución libre de agentes desnaturalizantes).
Cada una de estas categorías tiene diferentes fortalezas y debilidades:
- Las proteínas nativas producen antígenos excelentes y se han utilizado tradicionalmente para elevar anticuerpos policlonales personalizados para diferentes propósitos. Sin embargo, algunas proteínas no son fáciles de aislar en cantidades suficientes para su caracterización. Sólo una pequeña fracción de estas proteínas potencialmente útiles ha sido aislada y caracterizada. Esto hace que la mayoría de las proteínas nativas sean poco prácticas como medio para generar anticuerpos policlonales personalizados.
- La alternativa más lógica es la proteína recombinante que normalmente se produce en E. coli (ver nuestro paquete estándar 3 donde se incluye la producción de proteína recombinante).
En consideración a su estructura y tamaño, las proteínas representan inmunógenos fuertes.
Cuando se utiliza una proteína entera como antígeno para la producción de anticuerpos personalizados, es importante tener en cuenta que habrá diferentes sitios de unión, lo que significa que se detectarán diferentes epítopos que pueden disminuir la especificidad pero aumentar la accesibilidad. Como consecuencia, el riesgo de fracaso, debido a un epítopo inaccesible, por ejemplo, será muy bajo.
Los fragmentos de proteínas son generalmente más fáciles de producir que una proteína de longitud completa.
Supera las limitaciones de los péptidos cortos, pero requiere más esfuerzo y costo para producirlos. La amplia experiencia de ProteoGenix en la producción de proteínas recombinantes asegura la más alta tasa de éxito en la producción de antígenos de alta calidad críticos para la calidad de su producción de anticuerpos personalizados.
- El péptido químico es un antígeno muy popular para el desarrollo de los ab abs policlonales.
La síntesis de péptidos es más rápida y barata que la producción de proteínas, pero no todos los anticuerpos anti péptidos podrán reconocer la proteína nativa, por lo tanto, una cuidadosa elección de la secuencia de péptidos es de crucial importancia, razón por la cual siempre incluimos el diseño de péptidos utilizando nuestra propia herramienta de diseño de péptidos en nuestros servicios de anticuerpos policlonales antipéptidos.
Los anticuerpos antipéptidos muestran una mayor especificidad que permite:
- Eliminar o minimizar la reactividad cruzada potencial entre proteínas estructuralmente homólogas.
- La producción de anticuerpos policlonales contra el epítopo objetivo.
- La producción de anticuerpos policlonales para proteínas con modificaciones post-traduccionales.
- La discriminación entre dos o más isoformas de una proteína. (También es posible elegir un péptido presente en 2 proteínas si el propósito es detectar ambas!)
Los péptidos también son muy útiles para la producción de antisuero contra las modificaciones post-translacionales. Los
anticuerpos generados contra los péptidos suelen funcionar mejor para el BM y la HIC, donde los antígenos se desnaturalizan total o parcialmente.
El principal riesgo de los anticuerpos antipéptidos es que el anticuerpo no reconozca la proteína nativa si el anticuerpo policlonal se une a un epítopo inaccesible, por ejemplo. También puede fallar en dar buenos anticuerpos policlonales, especialmente para inmunoensayos que muestran proteína doblada.
Sin embargo, nuestra herramienta de diseño de péptidos puede ayudar a resolver estos problemas mediante la predicción de epítopos superficiales y modificaciones postraslacionales.
También recomendamos el uso de 2 ó 3 péptidos para reducir el riesgo relacionado con la accesibilidad de un epítopo para la producción de antisuero
Proteínas nativas purificadas de la fuente natural, fragmentos de proteínas recombinantes o proteínas de longitud completa (expresadas en una variedad de huéspedes como E. coli, células de mamíferos, etc.), péptidos químicos (hasta 22 aa) u otros compuestos de origen microbiano, fúngico o viral
Si los anticuerpos policlonales se van a utilizar en la proteína diana desnaturalizada (por ejemplo: Western blot, inmunohistoquímica en tejidos fijos), se prefieren formas desnaturalizadas de antígenos (como la pieza de gel, proteína en cuerpos de inclusión).
Si los anticuerpos policlonales se van a utilizar en proteínas diana nativas (por ejemplo: inmunoprecipitación), se prefieren formas de antígeno no desnaturalizadas (proteína en solución libre de agentes desnaturalizantes).
Cada una de estas categorías tiene diferentes fortalezas y debilidades:
- Las proteínas nativas producen antígenos excelentes y se han utilizado tradicionalmente para elevar anticuerpos policlonales personalizados para diferentes propósitos. Sin embargo, algunas proteínas no son fáciles de aislar en cantidades suficientes para su caracterización. Sólo una pequeña fracción de estas proteínas potencialmente útiles ha sido aislada y caracterizada. Esto hace que la mayoría de las proteínas nativas sean poco prácticas como medio para generar anticuerpos policlonales personalizados.
- La alternativa más lógica es la proteína recombinante que normalmente se produce en E. coli (ver nuestro paquete estándar 3 donde se incluye la producción de proteína recombinante).
En consideración a su estructura y tamaño, las proteínas representan inmunógenos fuertes.
Cuando se utiliza una proteína entera como antígeno para la producción de anticuerpos personalizados, es importante tener en cuenta que habrá diferentes sitios de unión, lo que significa que se detectarán diferentes epítopos que pueden disminuir la especificidad pero aumentar la accesibilidad. Como consecuencia, el riesgo de fracaso, debido a un epítopo inaccesible, por ejemplo, será muy bajo.
Los fragmentos de proteínas son generalmente más fáciles de producir que una proteína de longitud completa.
Supera las limitaciones de los péptidos cortos, pero requiere más esfuerzo y costo para producirlos. La amplia experiencia de ProteoGenix en la producción de proteínas recombinantes asegura la más alta tasa de éxito en la producción de antígenos de alta calidad críticos para la calidad de su producción de anticuerpos personalizados.
- El péptido químico es un antígeno muy popular para el desarrollo de los ab abs policlonales.
La síntesis de péptidos es más rápida y barata que la producción de proteínas, pero no todos los anticuerpos anti péptidos podrán reconocer la proteína nativa, por lo tanto, una cuidadosa elección de la secuencia de péptidos es de crucial importancia, razón por la cual siempre incluimos el diseño de péptidos utilizando nuestra propia herramienta de diseño de péptidos en nuestros servicios de anticuerpos policlonales antipéptidos.
Los anticuerpos antipéptidos muestran una mayor especificidad que permite:
- Eliminar o minimizar la reactividad cruzada potencial entre proteínas estructuralmente homólogas.
- La producción de anticuerpos policlonales contra el epítopo objetivo.
- La producción de anticuerpos policlonales para proteínas con modificaciones post-traduccionales.
- La discriminación entre dos o más isoformas de una proteína. (También es posible elegir un péptido presente en 2 proteínas si el propósito es detectar ambas!)
Los péptidos también son muy útiles para la producción de antisuero contra las modificaciones post-translacionales. Los
anticuerpos generados contra los péptidos suelen funcionar mejor para el BM y la HIC, donde los antígenos se desnaturalizan total o parcialmente.
El principal riesgo de los anticuerpos antipéptidos es que el anticuerpo no reconozca la proteína nativa si el anticuerpo policlonal se une a un epítopo inaccesible, por ejemplo. También puede fallar en dar buenos anticuerpos policlonales, especialmente para inmunoensayos que muestran proteína doblada.
Sin embargo, nuestra herramienta de diseño de péptidos puede ayudar a resolver estos problemas mediante la predicción de epítopos superficiales y modificaciones postraslacionales.
También recomendamos el uso de 2 ó 3 péptidos para reducir el riesgo relacionado con la accesibilidad de un epítopo para la producción de antisuero
Paso 1: Seleccione su antígeno
-
PÉPTIDO123 -
PROTEINAS -
FOSFOPÉPTIDO -
Yo proveo mi propio antígeno
Please note that the price includes a 20 AA peptide. Peptides over 20 AA will be extra charged.
Please note that the price includes a protein up to 500bp. Proteins over 500bp will be extra charged.
La letra resaltada en rojo no corresponde a ningún aminoácido reconocido por nuestro sistema. Puede ser un error tipográfico o una posible modificación específica. Corrija el error tipográfico o elimine dicha modificación y seleccione la etapa siguiente para continuar.
Secuencia enviada.
Su secuencia contiene más de 8 caracteres consecutivos idénticos o Lys o Arg, y esto puede conducir a dificultades en la síntesis. Por tanto, nuestro químico deberá revisar la secuencia antes de proporcionarle un presupuesto.
Nuestro sistema considera las letras minúsculas como D-aminoácidos. Si no necesita este tipo de aminoácidos, cambie las letras resaltadas en amarillo por letras mayúsculas.
+ ¿Qué cantidad de antígeno necesita?
| Conejo | >1.1mg of protein or >2.2mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Pollo | >2.5mg of protein or >2.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Cobaya | >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Rata | >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Ratón | >0.4mg of protein or >0.6mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Goat & Sheep | >10mg of protein or >10mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. |
You will be able to detail your needs at next step (species,...)
Introduzca su información de contacto y seleccione el paquete para visualizar los precios:
Como fabricante de anticuerpos experimentado, ProteoGenix ha producido con éxito más de 1500 anticuerpos policlonales durante los últimos 13 años.
Localización del antígeno:
Ofrecemos hasta 9 especies animales para la preparación de su anticuerpo policlonal. La elección más habitual es la de un anticuerpo policlonal de conejo. Otras especies resultan útiles para estudios de cotinción o para proteínas diana con alto grado de conservación, por ejemplo.
Step 2: choose your protocol
Seleccione una especie animal:
-
CONEJO -
GALLINA -
COBAYA -
RATA -
RATÓN -
CABRA -
OVEJA -
OTROS
No se dispone de fosfopéptido para esta especie, seleccione otra distinta
+ Defina la especie más adecuada para su preparación de anticuerpos policlonales
| Cantidad de suero/Sangrado final (por animal) | Comentario | |
|---|---|---|
| Conejo | 30-40 ml de antisuero o 1-10 mg de anticuerpos purificados. | El anticuerpo policlonal de conejo es la primera elección para la generación de anticuerpos. + Mejor consenso en términos de coste y cantidad de anticuerpo. |
| Pollo | 20-25 ml de antisuero/proyecto o 1-10 mg de anticuerpos purificados. | El anticuerpo de conejo tiene una distancia filogenética mayor a las especies de mamíferos. + De 5 a 10 veces más anticuerpos que con los conejos a lo largo de los años, ya que los anticuerpos se recogen de la yema de huevo. + Los anticuerpos de IgY de gallina normalmente generan menos ruido de fondo que los anticuerpos policlonales de conejo cuando se utilizan en aplicaciones que implican mamíferos. |
| Cobaya | 2,5-5 ml de antisuero o 1-10 mg de anticuerpos purificados. | + La respuesta inmune suele producirse rápidamente y es fuerte. + Baja cantidad de antígeno necesaria. - Animal muy sensible, debe tratarse con especial cuidado. - Cantidades de anticuerpos/suero bajas. |
| Rata | 2,5-5 ml de antisuero o 1-10 mg de anticuerpos purificados. | Con frecuencia, se utilizan para generar anticuerpos monoclonales como una alternativa a los ratones. - Los anticuerpos de rata también proporcionan una cantidad de anticuerpos/suero baja. |
| Ratón | 300-500µl de antisuero o 10-100 µg de anticuerpos purificados. | + Buena alternativa cuando se necesitan varias especies de anticuerpos para realizar múltiples tinciones simultáneas. + Respuestas inmunes fuertes - Cantidades de anticuerpos/suero bajas. |
| Goat & Sheep | 500-1000 ml of antiserum or >20mg of purified antibodies. | + Los anticuerpos de cabra y de oveja proporcionan cantidades de antisuero/anticuerpos grandes. - Es más difícil ensayar sueros preinmunes de varios animales para elegir el que genera menos ruido de fondo/reactividad cruzada con las muestras ensayadas. - Más caros que los anticuerpos policlonales de conejo (por ejemplo). |
¿Cuántos animales desearía inyectar?
-
1 -
2 -
3 -
4 -
5 -
10 -
OTROS
En función de su plazo, presupuesto y necesidades, podemos adaptar todas las etapas del proceso de desarrollo de anticuerpos policlonales para satisfacer por completo sus necesidades. Puede proporcionarnos un protocolo de producción de anticuerpos policlonales personalizado o utilizar nuestro protocolo ExpressWay o cualquiera de nuestros protocolos estándar con sus posibles opciones de ampliación.
Duración del protocolo:
-
ESTÁNDAR
+ AMPLIACIÓN OPCIONAL -
XPRESSWAY - 30 DAYS
Just for rabbit and mouseProtocolo ExpressWay no disponible para péptidosAvailable just for rabbit and mouse -
PERSONALIZADO
Aplicación final del anticuerpo:
-
ELISA -
WB -
IHC -
IF -
CITOMETRÍA DE FLUJO -
IP -
ELISA TIPO SÁNDWICH -
OTROS
Todos nuestros paquetes de producción de anticuerpos policlonales incluyen títulos garantizados en ELISA y, para anticuerpos policlonales anti-proteína, también podemos garantizar resultados de WB positivos (consulte el Paquete 3).
Por favor, introduzca su información de contacto para mostrar el precio:
Estimación de precios:
€ N/A
(Entrega en un punto/Impuestos no incluidos)
Producción de anticuerpos personalizados
DESCUENTO:
ESTIMATED DURATION*: N/A
Duration is predicted and indicative and can vary depending on several factors
Tipo de antígeno: Proteína
Antígeno proporcionado por: Usted
Localización de proteínas: Citoplasma
Animal elegido: Ratón
Número de animales para inyecciones: 1
Duración del protocolo: Estándar
Aplicación final de anticuerpos: ELISA
Purificación de anticuerpos: Sin purificación
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