Avez-vous besoin de cribler ou de caractériser un anticorps ? Obtenez 1 mg d’anticorps recombinant en 4 semaines pour l’utiliser dans le dépistage et la caractérisation des anticorps, les études précliniques et toute autre application à petite échelle. Notre système d’expression mammalien exclusif – XtenCHO™ – est le leader du marché de la production transitoire d’anticorps monoclonaux. Grâce à sa capacité avérée à effectuer un repliement et une glycosylation corrects des anticorps, XtenCHO™ surpasse même les solutions commerciales les plus compétitives comme ExpiCHO™. Rejoignez nous pour améliorer vos rendements de production et accédez à notre large gamme de services d’optimisation et de mise à l’échelle de votre production.
Pourquoi choisir ProteoGenix pour
la production de vos anticorps recombinants?
La première solution du marché
Notre système d’expression propriétaire dépasse même les rendements de production d’ExpiCHO !
Des prix compétitifs
790 € pour 1mg d’anticorps purifié* : grâce à XtenCHOTM obtenez des performances exceptionnelles !
Montant garanti
Nous garantissons la quantité commandée en suivant des directives de prix bien établies !
Experts en ingénierie des anticorps
Optimisez votre anticorps par humanisation, maturation d’affinité, développement d’anticorps bispécifiques… Générez et criblez rapidement de multiples variants d’anticorps pour accélérer vos projets de développement.
Diversité des formats d'anticorps
Protéines scFv, Fab, VHH, pleine longueur ou fusion d’anticorps… produisez votre anticorps dans le format de votre choix.
Délais courts
De votre séquence génétique à la production d’anticorps recombinants en 3 à 4 semaines !
Notre processus de production
d'anticorps recombinants
Séquençage des anticorps monoclonaux
- Séquençage de la longueur totale ou de la région variable
Séquençage des hybridomes
- Isolation de l’ARN
- Synthèse de l’ADNc
- Amplification des gènes d’anticorps
Séquençage de novo des protéines d’anticorps
- Digestion enzymatique
- Séparation LC-MS/MS
- Séquençage peptidique de novo
Synthèse des gènes et clonage
- Synthèse de gènes avec optimisation des codons pour le système d’expression sélectionné
- Sous-clonage dans un vecteur de haute expression
Transfection
- Amplification et préparation des plasmides
- Co-transfection des cellules cibles
Expression transitoire
- Expression à petite échelle de l’anticorps
- Purification des anticorps et analyse CQ
Services avancés
Analytique
Affinité (KD)
Stabilité
Agrégation
Purification
IEX
SEC
Autres
Une production stable
Dans CHO, HEK,
propriétaire GS-…
Contenu de notre service de synthèse
d'anticorps recombinants
| Etape | Contenu | Délai | Livrables |
|---|---|---|---|
| Séquençage des anticorps monoclonaux | A partir de lignées cellulaires d’hybridomes :
A partir d’échantillons d’anticorps purifiés :
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2 à 3 semaines pour les variables 3 à 4 semaines pour l’anticorps pleine longueur |
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| Synthèse des gènes et clonage |
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2 à 3 semaines |
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| Production d’anticorps monoclonaux +purification |
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A partir de 3 à 4 semaines |
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Options disponibles (liste non exhaustive) :
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XtenCHOTM : le système d'expression de référence pour la production transitoire d'anticorps monoclonaux
Recherchez-vous une production rapide d’anticorps à des prix compétitifs ? XtenCHO™ rend cela possible.
Grâce à notre protocole de transfection Xten interne, à notre lignée cellulaire propriétaire XtenCHO™, à plus de 28 ans d’expérience dans la production de recombinants et à plus de 500 projets de production d’anticorps réussis, nous disposons de la solution la plus compétitive du marché.
Avec des rendements de production dépassant régulièrement même ceux d’ExpiCHO™, nous sommes équipés pour surmonter vos défis uniques d’ expression d’anticorps tout en maintenant des coûts de production faibles.
Voici quelques exemples des incroyables résultats obtenus dans l’expression transitoire des biosimilaires.
Pour des résultats plus détaillés sur l’utilisation de XtenCHO™ pour la production d’anticorps recombinants, découvrez d’autres résultats incroyables en téléchargeant notre poster ou en regardant la présentation du Dr. Marcelo Viegas faite au Festival of Biologics (2020).
Étude de cas : production d'un anticorps recombinant, le Pembrolizumab
Objectif de l'étude
Nous présentons ici la production d’anticorps recombinants de Pembrolizumab à l’aide de notre système d’expression exclusif Xten.
Gènes et vecteurs d'expression
Les gènes codant pour la chaîne lourde (HC) et la chaîne légère (LC) de l’anticorps thérapeutique Pembrolizumab ont été synthétisés chimiquement avec des optimisations pour l’expression dans les cellules CHO. Les gènes ont été clonés dans le vecteur d’expression des cellules mammifères pTXs1, propriété de ProteoGenix. La carte vectorielle est fournie dans le rapport PDF.
Tests de production et de purification d'anticorps monoclonaux à petite échelle
Une préparation d’ADN sans endotoxine a été faite pour les constructions d’expression pTXs1. En utilisant le protocole de transfection exclusif de Xten, les plasmides ont ensuite été transfectés de manière transitoire dans le système exclusif XtenCHOTM cellules.
Le milieu de culture a été recueilli et le rendement de production a été déterminé par l’analyse Octet Red. L’anticorps recombinant a ensuite été purifié par affinité contre la protéine G.
CQ du Pembrolizumab purifié. Coloration au bleu de Coomassie.
A. SDS-PAGE non réduit. B. SDS-PAGE réduite.
Résultats de l'expression des anticorps du pembrolizumab
| Anticorps | Rendement de la production | Pureté |
|---|---|---|
| Pembrolizumab | 235mg/L | >95% |
Quels sont les avantages
d'un service de synthèse d'anticorps recombinants?
La synthèse d’anticorps recombinantsa constitué une avancée majeure dans le contexte du développement d’anticorps thérapeutiques, car elle présente plusieurs avantages par rapport à la production “traditionnelle” d’anticorps dans des lignées cellulaires d’hybridomes.
1 Reproductibilité, contrôle et sécurité optimaux
La production d’anticorps monoclonaux pour des applications thérapeutiques exige un contrôle et une reproductibilité élevés. Parce que des paramètres cruciaux tels que Les séquences d’ADN et de protéines sont définies chimiquement,La production d’anticorps recombinants permet de créer un processus standardisé pour la production d’anticorps monoclonaux avec de très faibles variations d’un lot à l’autre. Comme la production d’anticorps recombinants commence à partir d’un anticorps ou d’une séquence d’ADN connus, les mutations ou la dérive des lignées cellulaires qui peuvent se produire dans les lignées d’hybridomes sont également évitées.
2 Haute pureté
La production d’anticorps recombinants permet d’obtenir un degré de pureté élevé grâce àl’absence de contaminants sériques.
3 Facilité d’ingénierie et de reformatage
La production d’anticorps monoclonaux recombinants permet d’accéder au contrôle de la structure de l’anticorps au niveau génétique. Cela est particulièrement important dans le cadre du développement d’anticorps thérapeutiques, car cela permet de moduler les propriétés pharmacologiques d’un anticorps.
La possibilité de modifier le gène, qui sera ensuite exprimé par un système d’expression sélectionné, donne également accès à une gamme infinie de solutions en termes de.. :
- Reformatage: changement d’espèce, d’isotype ou de sous-type
- Ingénierie des anticorps: humanisation des anticorps monoclonaux, maturation par affinité, anticorps bispécifiques, conjugués anticorps-médicaments (ADC), fragments d’anticorps (Fab, Fab2, scFv).
4 Pas d’utilisation d’animaux
Aujourd’hui, une attention de plus en plus grande est accordée à l’éthique et au bien-être des animaux. Grâce à la technologie de production recombinante, les anticorps peuvent être produits rapidement sans recourir à l’utilisation d’animaux à aucune étape du processus.
Transitoire ou stable ? Quel
service de synthèse d'anticorps recombinants choisir ?
Le choix de la solution la plus appropriée pour votre production d’anticorps monoclonaux peut avoir un impact majeur sur votre projet, par exemple en termes de temps. Pour cette raison, nous mettons à votre disposition cette courte section expliquant comment décider entre l’expression transitoire ou stable d’un anticorps.
La production d’anticorps recombinants présente un avantage principal : elle permet la production rapide d’une assez importante quantité d’anticorps.. Cependant, lors de la transfection transitoire, le gène transfecté n’intègre pas le génome de l’hôte et peut être perdu en plusieurs jours (sur une courte période, quelques jours). Ainsi, il peut être la solution parfaite pour les applications à court terme telles que expression de protéines à petite échelle.
La génération de lignées cellulaires stables est liée à l’intégration d’un gène synthétique dans le génome hôte du système d’expression. Comme le processus de développement peut être long et compliqué (>3 mois), les lignées cellulaires stables sont privilégiées pour les applications à long terme telles que production d’anticorps thérapeutiques. Pour la bioproduction à grande échelle, une lignée cellulaire stable permet de construire un processus standardisé qui garantit un rendement plus élevé et un contrôle de qualité.
Pour toute question supplémentaire, n’hésitez pas à contacter notre responsable de compte PhD qui se fera un plaisir de vous guider vers la solution de production d’anticorps la plus adaptée.
Quelles sont les applications de l'expression transitoire d'anticorps ?
L’expression transitoire d’anticorps dans les systèmes mammifères est utile pour de nombreuses applications. Ces systèmes combinent le repliement correct des protéines et leur modification post-traductionnelle avec des délais courts, ce qui les rend inestimables pour.. :
- Le criblage de candidats médicaments : l’expression transitoire permet de produire des quantités définies d’anticorps dans des systèmes très similaires à ceux utilisés pour la production biopharmaceutique commerciale. De cette façon, la production transitoire permet une caractérisation préliminaire de ces molécules ainsi que la détection des obstacles potentiels à la production, augmentant ainsi de façon exponentielle la possibilité de développer des anticorps.
- Dépistage des variants d’anticorps : des variants d’anticorps sont fréquemment produits pour tenter d’améliorer certaines propriétés biophysiques des anticorps, notamment l’affinité et la stabilité. Des variants sont également produits au cours du processus d’humanisation des anticorps. Dans ce cas, la production à petite échelle de plusieurs variants permet de sélectionner les meilleurs candidats pour un développement ultérieur.
- Production à petite échelle pour les applications analytiques :ces systèmes permettent la production rapide d’anticorps ou de fragments de ceux-ci dans de nombreux formats différents. Étant donné que les systèmes mammifères sécrètent efficacement ces molécules dans les milieux de culture, elles peuvent être purifiées à l’aide de méthodes peu coûteuses telles que la purification de protéine A/G. Ces lots d’anticorps très purs peuvent être facilement conjugués avec des marqueurs enzymatiques ou fluorescents pour des applications de recherche ou de diagnostic.
Production d'anticorps recombinants : cellules et approches
Les systèmes d’expression mammaliens basés sur les cellules d’ovaire de hamster chinois (CHO) ou de rein embryonnaire humain (HEK) sont les solutions les plus robustes du secteur pour l’expression d’anticorps recombinants.
Leur capacité à effectuer une glycosylation de type humain (cruciale pour réduire l’immunogénicité des anticorps), un repliement correct des protéines et leurs voies de sécrétion efficaces rendent le processus idéal pour les applications thérapeutiques. Les cellules utilisées pour la production d’anticorps doivent être capables de maintenir une productivité élevée et une constance de lot à lot. Tous ces critères sont remplis par notre lignée cellulaire propriétaire XtenCHO™.
Notre vaste expertise dans la production d’anticorps dans les systèmes CHO et HEK est également complétée par plus de 28 ans d’expérience dans la production de protéines dans un certain nombre de systèmes, notamment les cellules de bactéries, de levures et d’insectes.
L’utilisation de ces systèmes pour la synthèse d’anticorps recombinants continue de gagner en popularité en raison de la demande croissante de solutions moins coûteuses et plus rapides. Bien que XtenCHO™ reste notre référence pour la production d’anticorps, nous sommes également en mesure de produire des anticorps complets ou des fragments d’anticorps dans tous ces systèmes alternatifs.
Quels sont les avantages et les limites de ces alternatives par rapport aux systèmes de production en cellules mammifères ?
| Systèmes de cellules mammifères | Systèmes bactériens | Systèmes de levure | |
|---|---|---|---|
| Avantages |
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| Limites |
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Quel système devez-vous choisir pour l’expression recombinante de votre anticorps ?
Chaque projet est évalué au cas par cas. Nous sommes donc toujours en mesure de proposer la meilleure solution en fonction de la structure de votre anticorps, de l’application prévue, du budget et du calendrier disponibles, et de l’échelle de production.
En savoir plus sur nos services d’expression de protéines dans :
Bactéries
Découvrez notre service d’expression de protéines dans Escherichia coli ou Bacillus subtilis et bénéficiez d’un délai d’exécution court et d’une productivité élevée
Levure
Apprenez-en davantage sur nos protocoles de production de protéines dans Saccharomyces cerevisiae ou Pichia pastoris pour une production optimale et l’extensibilité du processus.
Cellules d'insecte
Produisez vos protéines dans des baculovirus/cellules d’insecte pour améliorer le repliement des protéines et obtenir des modifications post-traductionnelles précises.
Production d'anticorps monoclonaux:
Du gène à la bioproduction
La production réussie d’anticorps recombinants commence par une optimisation minutieuse des gènes, des vecteurs et des protocoles de transfection. Ces détails apparemment sans importance représentent l’une des étapes les plus importantes du processus de synthèse d’anticorps. Tous ces paramètres doivent être compatibles avec les exigences des cellules utilisées pour la production d’anticorps.
Accédez à notre page dédiée aux questions les plus fréquemment posées (FAQ) sur les anticorps recombinants, pour en savoir plus sur toutes les étapes du processus de production ainsi que sur les recommandations de ProteoGenix pour vous aider à atteindre des niveaux de production élevés et constants dans votre projet.
ProteoGenix a guidé des milliers de chercheurs tout au long de leurs projets de production d’anticorps monoclonaux depuis 2003. En tant que fournisseur d’une solution unique, nous maîtrisons l’ensemble du processus de développement des anticorps, de la génération d’anticorps par le développement d’hybridomes ou phage display, à la production d’anticorps recombinants dans XtenCHOTM et la génération de lignées cellulaires stables. Faire confiance à ProteoGenix, leader de la production d’anticorps monoclonaux, c’est la garantie de faire passer votre projet au niveau supérieur !
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*A partir de 4 anticorps
