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+ Comment choisir mon antigène ?
Quel(s) type(s) d'antigène(s) peut-on injecter pour obtenir des anticorps polyclonaux personnalisés ?
Des Protéines natives purifiées à partir de source naturelle, des fragments de protéines recombinantes ou protéines pleine longueur (exprimées dans une variété d'hôtes tels que E. coli, cellules de mammifères, etc), des peptides chimiques (jusqu'à 22 aa) ou autres composés d'origine microbienne, fongique ou virale..
Si les anticorps polyclonaux doivent être utilisés sur la protéine cible dénaturée (exemple : Western blot, immunohistochimie sur tissus fixes), les formes dénaturées d'antigènes sont préférables (comme le morceau de gel, protéine dans les corps d'inclusion).
Si les anticorps polyclonaux doivent être utilisés sur des protéines cibles natives (exemple : immunoprécipitation), des formes non dénaturées d'antigène sont préférées (protéine en solution sans agents dénaturants).
Chacune de ces catégories présente des forces et des faiblesses différentes :
- Les protéines natives constituent d'excellents antigènes et ont traditionnellement été utilisées pour produire des anticorps polyclonaux personnalisés à différentes fins. Cependant, certaines protéines ne sont pas faciles à isoler en quantités suffisantes pour la caractérisation. Seule une petite fraction de ces protéines potentiellement utiles a été isolée et caractérisée. Cela rend la plupart des protéines natives impraticables comme moyen de produire des anticorps polyclonaux personnalisés.
- L'alternative la plus logique est la protéine recombinante qui est habituellement produite dans E. coli (voir notre paquet standard 3 où la production de protéine recombinante est incluse).
Compte tenu de leur structure et de leur taille, les protéines représentent des immunogènes puissants.
Lorsque vous utilisez une protéine entière comme antigène pour la production d'anticorps personnalisés, il est important de considérer qu'il y aura différents sites de liaison, c'est-à-dire différents épitopes détectés qui peuvent diminuer la spécificité mais augmenter l'accessibilité. En conséquence, le risque d'échec, dû à un épitope inaccessible par exemple, sera très faible.
Les fragments de protéines sont généralement plus faciles à produire qu'une protéine pleine longueur.
Il surpasse les limites des peptides courts, mais nécessite plus d'efforts et de coûts pour les produire. La grande expérience de ProteoGenix dans la production de protéines recombinantes assure le plus haut taux de succès dans la production d'antigènes de haute qualité critique pour la qualité de votre production d'anticorps personnalisés.
- Le peptide chimique est un antigène populaire pour le développement des ab polyclonaux.
La synthèse peptidique est plus rapide et moins coûteuse que la production de protéines, mais tous les anticorps anti peptides ne seront pas capables de reconnaître la protéine native. Un choix minutieux de la séquence peptidique est d'une importance cruciale. C'est la raison pour laquelle nous utilisons toujours notre propre outil de conception peptidique dans nos services d'anticorps polyclonaux anti-peptides.
Les anticorps antipeptides possèdent une spécificité accrue qui permet :
- D`éliminer ou minimiser la réactivité croisée potentielle entre les protéines structurellement homologues.
- La production d'anticorps polyclonaux contre l'épitope ciblé.
- La production d'anticorps polyclonaux pour les protéines avec des modifications post-traductionnelles.
- La discrimination entre deux ou plusieurs isoformes d'une protéine. (Il est également possible de choisir un peptide présent sur 2 protéines si le but est de les détecter toutes les deux !)
Les peptides sont également très utiles pour la production d'antisérum contre les modifications post-traductionnelles. (Voir notre paquet d'anticorps spécifiques phospho)
Les anticorps générés contre les peptides fonctionnent généralement mieux pour WB et ICH où les antigènes sont complètement ou au moins partiellement dénaturés.
Le principal risque avec les anticorps antipeptides est que l'anticorps ne reconnaisse pas la protéine native si l'anticorps polyclonal se lie à un épitope inaccessible par exemple. Il peut également ne pas générer de bons anticorps polyclonaux, en particulier pour les immunoessais qui présentent des protéines repliées.
Cependant, notre outil de conception de peptides peut aider à résoudre ces problèmes en prédisant les épitopes de surface et les modifications post-traductionnelles.
Nous recommandons également l'utilisation de 2 ou 3 peptides pour réduire le risque lié à l'accessibilité d'un épitope pour la production d'antisérum
Des Protéines natives purifiées à partir de source naturelle, des fragments de protéines recombinantes ou protéines pleine longueur (exprimées dans une variété d'hôtes tels que E. coli, cellules de mammifères, etc), des peptides chimiques (jusqu'à 22 aa) ou autres composés d'origine microbienne, fongique ou virale..
Si les anticorps polyclonaux doivent être utilisés sur la protéine cible dénaturée (exemple : Western blot, immunohistochimie sur tissus fixes), les formes dénaturées d'antigènes sont préférables (comme le morceau de gel, protéine dans les corps d'inclusion).
Si les anticorps polyclonaux doivent être utilisés sur des protéines cibles natives (exemple : immunoprécipitation), des formes non dénaturées d'antigène sont préférées (protéine en solution sans agents dénaturants).
Chacune de ces catégories présente des forces et des faiblesses différentes :
- Les protéines natives constituent d'excellents antigènes et ont traditionnellement été utilisées pour produire des anticorps polyclonaux personnalisés à différentes fins. Cependant, certaines protéines ne sont pas faciles à isoler en quantités suffisantes pour la caractérisation. Seule une petite fraction de ces protéines potentiellement utiles a été isolée et caractérisée. Cela rend la plupart des protéines natives impraticables comme moyen de produire des anticorps polyclonaux personnalisés.
- L'alternative la plus logique est la protéine recombinante qui est habituellement produite dans E. coli (voir notre paquet standard 3 où la production de protéine recombinante est incluse).
Compte tenu de leur structure et de leur taille, les protéines représentent des immunogènes puissants.
Lorsque vous utilisez une protéine entière comme antigène pour la production d'anticorps personnalisés, il est important de considérer qu'il y aura différents sites de liaison, c'est-à-dire différents épitopes détectés qui peuvent diminuer la spécificité mais augmenter l'accessibilité. En conséquence, le risque d'échec, dû à un épitope inaccessible par exemple, sera très faible.
Les fragments de protéines sont généralement plus faciles à produire qu'une protéine pleine longueur.
Il surpasse les limites des peptides courts, mais nécessite plus d'efforts et de coûts pour les produire. La grande expérience de ProteoGenix dans la production de protéines recombinantes assure le plus haut taux de succès dans la production d'antigènes de haute qualité critique pour la qualité de votre production d'anticorps personnalisés.
- Le peptide chimique est un antigène populaire pour le développement des ab polyclonaux.
La synthèse peptidique est plus rapide et moins coûteuse que la production de protéines, mais tous les anticorps anti peptides ne seront pas capables de reconnaître la protéine native. Un choix minutieux de la séquence peptidique est d'une importance cruciale. C'est la raison pour laquelle nous utilisons toujours notre propre outil de conception peptidique dans nos services d'anticorps polyclonaux anti-peptides.
Les anticorps antipeptides possèdent une spécificité accrue qui permet :
- D`éliminer ou minimiser la réactivité croisée potentielle entre les protéines structurellement homologues.
- La production d'anticorps polyclonaux contre l'épitope ciblé.
- La production d'anticorps polyclonaux pour les protéines avec des modifications post-traductionnelles.
- La discrimination entre deux ou plusieurs isoformes d'une protéine. (Il est également possible de choisir un peptide présent sur 2 protéines si le but est de les détecter toutes les deux !)
Les peptides sont également très utiles pour la production d'antisérum contre les modifications post-traductionnelles. (Voir notre paquet d'anticorps spécifiques phospho)
Les anticorps générés contre les peptides fonctionnent généralement mieux pour WB et ICH où les antigènes sont complètement ou au moins partiellement dénaturés.
Le principal risque avec les anticorps antipeptides est que l'anticorps ne reconnaisse pas la protéine native si l'anticorps polyclonal se lie à un épitope inaccessible par exemple. Il peut également ne pas générer de bons anticorps polyclonaux, en particulier pour les immunoessais qui présentent des protéines repliées.
Cependant, notre outil de conception de peptides peut aider à résoudre ces problèmes en prédisant les épitopes de surface et les modifications post-traductionnelles.
Nous recommandons également l'utilisation de 2 ou 3 peptides pour réduire le risque lié à l'accessibilité d'un épitope pour la production d'antisérum
Étape 1 : Sélectionnez votre antigène
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PEPTIDE123 -
PROTÉINES -
PHOSPHOPEPTIDE -
Je fournis mon propre antigène
Please note that the price includes a 20 AA peptide. Peptides over 20 AA will be extra charged.
Please note that the price includes a protein up to 500bp. Proteins over 500bp will be extra charged.
La lettre surlignée en rouge ne correspond à aucun acide aminé reconnu par notre système. C'est soit une coquille, soit une modification spécifique possible. Veuillez corriger la faute de frappe ou supprimer la modification et sélectionner l'étape suivante pour continuer.
Séquence envoyée.
Votre séquence contient plus de 8 caractères consécutifs identiques ou Lys ou Arg qui peuvent entraîner des difficultés de synthèse et la séquence doit être vérifiée par notre chimiste pour fournir un devis.
Les minuscules sont considérées par notre système comme des acides aminés D. Si vous n'avez pas besoin de ce type d'acides aminés, veuillez remplacer les lettres surlignées en jaune par des lettres majuscules.
+ De quelle quantité d'antigène avez-vous besoin ?
| Lapin | >1.1mg of protein or >2.2mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Poulet | >2.5mg of protein or >2.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Cochon d'Inde | >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Rat | >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Souris | >0.4mg of protein or >0.6mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. | |
| Goat & Sheep | >10mg of protein or >10mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing. |
You will be able to detail your needs at next step (species,...)
Indiquez vos coordonnées et sélectionnez une formule pour afficher son prix :
Expert du développement d’anticorps, ProteoGenix a produit plus de 1 500 anticorps polyclonaux ces 13 dernières années.
Localisation de l'antigène:
Nous pouvons préparer vos anticorps polyclonaux dans neuf espèces animales différentes. L’espèce la plus fréquemment utilisée est le lapin. Les autres espèces peuvent être utiles pour des expériences d’immuno-histologie en double marquage ou pour des protéines cibles hautement conservées, par exemple.
Step 2: choose your protocol
Sélectionnez une espèce animale:
-
LAPIN -
POULE -
COBAYE -
RAT -
SOURIS -
CHÈVRE -
MOUTON -
AUTRE
Le phosphopeptide n’est pas disponible pour cette espèce, sélectionnez une autre espèce.
+ Définir l'espèce la plus appropriée pour votre préparation d'anticorps polyclonaux
| Quantité de sérum / saignée finale (par animal) | Commentaire | |
|---|---|---|
| Lapin | 30-40 ml d’antisérum ou 1-10 mg d’anticorps purifiés. | Le lapin est l’espèce de prédilection pour la génération d’anticorps polyclonaux. + Meilleur compromis entre le coût et la quantité d’anticorps. |
| Poulet | 20-25 ml d’antisérum/projet ou 1-10 mg d’anticorps purifiés. | Les anticorps de poule sont phylogénétiquement plus distants des anticorps des espèces mammifères. + 5 à 10 fois plus d’anticorps qu’avec le lapin au cours des années, étant donné que les anticorps sont recueillis dans le jaune d’œuf. + Les anticorps IgY de poule génèrent généralement moins de bruit de fond que les anticorps polyclonaux de lapin dans les applications impliquant des mammifères. |
| Cochon d'Inde | 2,5-5 ml d’antisérum ou 1-10 mg d’anticorps purifiés. | + La réponse immune apparaît généralement rapidement et est forte. + Faible quantité d’antigène requise. - Animal très sensible qui doit être manipulé avec soins. - Faible quantité d’anticorps/sérum. |
| Rat | 2,5-5 ml d’antisérum ou 1-10 mg d’anticorps purifiés. | Souvent utilisé à la place de la souris pour la génération d’anticorps. - Le rat génère également de faibles quantités d’anticorps/sérum. |
| Souris | 300-500µl d'antisérum ou 10-100 µg d'anticorps purifiés. | + Bonne alternative lorsqu’il faut des anticorps de plusieurs espèces pour plusieurs histomarquages simultanés. + Forte réponse immune - Faible quantité d’anticorps/sérum. |
| Goat & Sheep | 500-1000 ml of antiserum or >20mg of purified antibodies. | + La chèvre et le mouton permettent de générer de grandes quantités d’antisérum/anticorps. - Plus difficile de tester le sérum pré-immun de plusieurs animaux pour choisir celui présentant le moins de bruit de fond et de réactivité croisée avec les échantillons testés. - Plus coûteux que la production de polyclonaux chez le lapin (par exemple). |
Combien d’animaux souhaiteriez-vous injecter ?
-
1 -
2 -
3 -
4 -
5 -
10 -
AUTRE
Nous pouvons adapter toutes les étapes de notre processus de développement d’anticorps polyclonaux à vos délais, votre budget et vos besoins. Nous pouvons utiliser votre protocole de production d’anticorps polyclonaux ou notre protocole standard ou XpressWay avec nos protocoles d’extension en option.
Durée du protocole:
-
STANDARD
+ EXTENSION FACULTATIVE -
XPRESSWAY - 30 DAYS
Just for rabbit and mouseXpressWay non dispo pour peptideAvailable just for rabbit and mouse -
À FAÇON
Application finale des anticorps:
-
ELISA -
WB -
IHC -
IF -
CYTOMÉTRIE EN FLUX -
IP -
ELISA EN SANDWICH -
AUTRE
Toutes nos formules de production d’anticorps polyclonaux comprennent le titre garanti en ELISA, et pour les anticorps polyclonaux anti-protéine, nous garantissons des résultats de Western blot positifs (voir la formule 3).
Veuillez entrer vos coordonnées pour afficher le prix:
Estimation du prix
€ S.O.
(DAP / hors taxes)
Production d’anticorps à façon
REMISE:
ESTIMATED DURATION*: S.O.
Duration is predicted and indicative and can vary depending on several factors
Type d'antigène: Protéine
Antigène fourni par: Vous
Localisation des protéines: Cytoplasme
Animal choisi: Souris
Nombre d'animaux pour injections: 1
Durée du protocole: Standard
Application finale des anticorps: ELISA
Purification des anticorps: Pas de purification
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