Particolari del pacchetto

 
  • Progettazione dell'antigene (progettazione del frammento più appropriato da produrre)
  • Sintesi di 2 geni (ciascun gene ottimizzato per un sistema di espressione specifica) e 2 subclonings
  • Test di espressione in 2 sistemi, compresi tra E. coli, B. Subtilis, P. Pastoris, cellule di insetto e cellule di mammifero. Stabiliti da ProteoGenix. Versione GFP-tagged realizzata in parallelo per verificare le specificità della colorazione IF.
  • Produzione dell'antigene nel sistema di espressione più appropriato a seconda del rendimento e delle esigenze di progetto.
  • Iniezioni in topi
  • Controllo della risposta immunitaria in IF con cellule transfettate con proteina GFP ottenuta durante i test di espressione dell'antigene.
  • Selezione dei migliori 2 topi per 2 fusioni in modo da avere un gran numero e varietà di cloni
  • Screening del prodotto di fusione in IF su cellule transfettate direttamente
  • Controllo specificità attraverso GFP
  • Subcloning di 2 cloni parentali (2-3 giri di diluizioni limitanti)
  • Produzione e purificazione di 2mg dal miglior clone
  • 10 -20 dei migliori cloni allo stadio parentale per la selezione da parte del cliente
  • 100 µgdi anticorpo purificato per confermare l'acquisto dell'ibridoma
  • 50 µg di proteina purificata
  Dopo il pagamento totale:
  • 1,9 mg di anticorpo purificato
  • 1 linea cellulare di ibridomi (4 flaconi congelati)
  • 150 µg di proteina purificata
  • Gene in pUC57
  • Livello 1: Se non riusciamo a produrre un anticorpo che rileva l'immunògeno in IF addebitiamo 1.000 Euro
  • Livello 2: Se riusciremo a produrre un anticorpo che funziona in IF contro l'immunògeno, verrà addebitato un parte del costo
  • Livello 3: Se, dopo aver testato l'anticorpo purificato, il cliente vuole ricevere l'ibridoma, verrà addebitato l'intero prezzo del pacchetto
  • Sintesi del gene: 3-4 settimane
  • Produzione di proteine: 7-9 settimane
  • Iniezioni: 8-12 settimane
  • Screening della fusione: 5-6 settimane
  • Subcloning: 10-15 settimane
  • Produzione di anticorpi: 3-4 settimane
  • Totale: 36-50 settimane