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+ Come scegliere il mio antigene?
Che tipo di antigene può essere iniettato per ottenere anticorpi policlonali personalizzati?
Proteine indigene purificate dalla fonte naturale, frammenti di proteine ricombinanti o proteine a figura intera (espresse in una varietà di ospiti come E. coli, cellule di mammiferi, ecc.), peptidi chimici (fino a 22 aa) o altri composti di origine microbica, fungina o virale

Se gli anticorpi policlonali vengono utilizzati sulla proteina bersaglio denaturata (esempio: Western blot, immunoistochimica su tessuti fissi), si preferiscono forme denaturate di antigeni (come il pezzo di gel, proteine nei corpi di inclusione).
Se gli anticorpi policlonali vengono utilizzati su proteine native target (esempio: immunoprecipitazione), si preferiscono forme non denaturate di antigene (proteine in soluzione priva di agenti denaturanti).

Ognuna di queste categorie ha diversi punti di forza e di debolezza:
-Le proteine native producono ottimi antigeni e sono state tradizionalmente utilizzate per ottenere anticorpi policlonali personalizzati per scopi diversi. Tuttavia, alcune proteine non sono facili da isolare in quantità sufficienti per la caratterizzazione. Solo una piccola parte di queste proteine potenzialmente utili è stata isolata e caratterizzata. Questo rende la maggior parte delle proteine native impraticabili come mezzo per generare anticorpi policlonali personalizzati.

- L'alternativa più logica è la proteina ricombinante che di solito viene prodotta in E. coli (vedi il nostro Pacchetto standard 3 dove è inclusa la produzione di proteine ricombinanti).
In considerazione della loro struttura e dimensione, le proteine rappresentano un forte immunogeno.
Quando si utilizza una proteina intera come antigene per la produzione di anticorpi personalizzati, è importante considerare che ci saranno diversi siti di legame, il che significa epitopi diversi rilevati che possono diminuire la specificità ma aumentare l'accessibilità. Di conseguenza, il rischio di fallimento, ad esempio a causa di un epitopo inaccessibile, sarà molto basso.
I frammenti di proteine sono generalmente più facili da produrre di una proteina a figura intera.

Supera i limiti dei peptidi corti, ma richiede maggiori sforzi e costi per produrli. La vasta esperienza di ProteoGenix nella produzione di proteine ricombinanti assicura il più alto tasso di successo nella produzione di antigene di alta qualità, fondamentale per la qualità della vostra produzione di anticorpi personalizzati.

- Il peptide chimico è un antigene popolare per lo sviluppo policlonale ab.
La sintesi del peptide è più veloce ed economica della produzione proteica, ma non tutti gli anticorpi anti peptide saranno in grado di riconoscere la proteina nativa, quindi un'attenta scelta della sequenza di peptide è di fondamentale importanza, motivo per cui includiamo sempre la progettazione del peptide utilizzando il nostro strumento proprietario di progettazione peptide nei nostri servizi di anticorpi policlonali antipeptide.

Anticorpi antipeptidici mostrano una maggiore specificità che permette di:
- Elimina o minimizza la potenziale reattività incrociata tra proteine strutturalmente omologhe.
- Consente la produzione di anticorpi policlonali per l'epitopo bersaglio.
- Consente la produzione di anticorpi policlonali per proteine con modificazioni post-traslazionali.
- Permette la discriminazione tra due o più isoforme di una proteina. (E' anche possibile scegliere un peptide presente su 2 proteine se lo scopo è quello di rilevarle entrambe!)

I peptidi sono anche molto utili per la produzione di antisiero contro le modifiche post-traslazionali.

Gli anticorpi generati contro i peptidi di solito funzionano meglio per WB e ICH dove gli antigeni sono completamente o almeno parzialmente denaturati.





Il rischio principale con gli anticorpi anti-peptide è che l'anticorpo non riconosce la proteina nativa se l'anticorpo policlonale, ad esempio, lega un epitopo inaccessibile. Può anche non dare buoni anticorpi policlonali, specialmente per i test immunoenzimatici che mostrano proteine ripiegate.
Tuttavia, il nostro strumento di progettazione dei peptidi può aiutare a risolvere tali problemi prevedendo epitopi di superficie e modifiche post-traslazionali.
Di solito raccomandiamo anche l'uso di 2 o 3 peptidi per ridurre il rischio legato all'accessibilità di un epitopo per la produzione di antisiero

Passo 1: Seleziona il tuo antigene

  1. Peptide antigen
    PEPTIDE
    1
    2
    3
  2. PROTEINE
  3. FOSFOPEPTIDE
  4. Fornisco il mio antigene

Please note that the price includes a 20 AA peptide. Peptides over 20 AA will be extra charged.

Please note that the price includes a protein up to 500bp. Proteins over 500bp will be extra charged.

Le lettere evidenziate in rosso non corrispondono ad alcun Aminoacido riconosciuto dal nostro sistema. E' un errore di battitura o una possibile modificazione specifica. Si prega di correggere l'errore di battitura o rimuovere la modifica e selezionarla nella fase successiva per procedere.

Sequenza Sentenza.

La vostra sequenza contiene più di 8 caratteri identici consecutivi o Lys o Arg che possono portare a difficoltà di sintesi e la sequenza dovrebbe essere controllata dal nostro chimico per fornire un preventivo.

Le lettere minuscole sono considerate dal nostro sistema come D-Amino Acidi, se non si richiede questo tipo di Aminoacidi, si prega di sostituire le lettere gialle evidenziate con lettere maiuscole.

+ Di quale quantità di antigene avete bisogno?
Coniglio >1.1mg of protein or >2.2mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing.
Pollo >2.5mg of protein or >2.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing.
Porcellino d'India >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing.
Ratto >0.7mg of protein or >1.5mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing.
Topo >0.4mg of protein or >0.6mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing.
Goat & Sheep >10mg of protein or >10mg of conjugated peptide and 0.5mg of unconjugated peptide for ELISA testing.
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Quale produttore esperto di anticorpi, ProteoGenix ha preparato con successo più di 1.500 anticorpi policlonali nel corso degli ultimi 13 anni.

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Produzione di anticorpi personalizzati

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ESTIMATED DURATION*: N/A Duration is predicted and indicative and can vary depending on several factors

Sommario

Tipo di antigene: Proteina

Antigene fornito da: Cliente

Localizzazione delle proteine: Citoplasma

Animale scelto: Topo

Numero di animali per iniezioni: 1

Durata del protocollo: Standard

Applicazione finale degli anticorpi: ELISA

Purificazione degli anticorpi: Nessuna purificazione

 

Consegnabile & Garanzie
Antigene

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